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呋喃西林代谢物ELISA试剂盒样本处理方法
点击次数：4686 发布时间：2018/8/9 12:45:57
呋喃西林代谢物ELISA试剂盒样本处理方法
牛奶样本处理方法
1）取5ml样本于离心管中，加250ul 亚硝基铁氰化钾溶液（配液1）振荡混合30秒，加250ul 硫酸锌溶液（配液2）振荡混合30秒，15℃4000转/分离心10分钟；
2）取上清1.1ml，加4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；
3）在37℃过夜孵育(约16小时)或50℃（超过50℃时会影响分层效果）水浴孵育3小时；
4）分别加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液，0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯，振荡5分钟；
5）室温下4000转/分，离心10分钟；
6）取出2.5ml的上层液到另一个离心管中，50-60℃氮气或空气吹干；
7）用1ml正已烷溶解残留物，加入1ml复溶工作液充分振荡混合30秒；室温4000转/分，离心10分钟；
8）去除上层正已烷，取50μl下层液用于分析。
样本稀释倍数为2 检测下限：0.1ppb
奶粉、蛋粉样本处理方法
1）称取1±0.05g均质样于离心管中，加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；
2）在37℃过夜孵育(约16小时)或50℃（超过50℃时会影响分层效果）水浴孵育3小时；
3）加250ul 亚硝基铁氰化钾溶液（配液1）振荡混合30秒，加250ul 硫酸锌溶液（配液2）振荡混合30秒，15℃4000转/分离心10分钟；
4）取全部上清到另一个离心管中，后续接“5.3.1 牛奶样本处理方法，4）”
5.3.3 蜂蜜、组织、肠衣、肝脏、饲料、鸡蛋样本处理方法
1）称取1±0.05g均质样于离心管中，加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；
2）后续接“5.3.1 牛奶样本处理方法，3）”
熟食样本处理方法
1）称取1±0.05g均质样于50ml离心管中，加入4.5ml甲醇和0.5ml去离子水，振荡2min，室温4000转/分，离心5分钟，去除全部液体；
2）加入5ml乙氰和5ml正己烷，振荡2min，室温4000转/分，离心5分钟，去除全部液体；
3）在沉淀中加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；
注：熟食的添加回收试验请在此步加入高标准。
4）后续接“5.3.1 牛奶样本处理方法，3）”
原创作者：上海臻科生物科技有限公司
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